近日，印度东部西孟加拉邦暴发的尼帕病毒（Nipah virus，简称NiV）疫情，再次为全球公共卫生安全敲响警钟。据新华社1月26日报道，该地已确认5例感染病例，近100人被隔离观察。邻近的泰国、尼泊尔等国已紧急加强口岸筛查，我国虽暂未报告病例，但一年前修订的《中华人民共和国国境卫生检疫法》也已将尼帕病毒正式纳入检测范围。这场疫情之所以引发高度警觉，与其巨大的潜在威胁密不可分。
世界卫生组织已将尼帕病毒列为“优先病原体”，其可怕的病死率是主要原因之一。历史数据显示，疫情的病死率可高达40%至75%。感染后潜伏期一般为4至14天，最长可达45天，患者临床表现复杂，从无症状感染到急性呼吸道症状，直至致命性脑炎。早期症状常表现为发热、头痛、肌痛、呕吐和喉咙痛，易与流感混淆；但病情可迅速发展为头晕、嗜睡、意识模糊，甚至昏迷。部分患者会出现非典型肺炎或严重呼吸道症状，而脑炎则可能导致永久性神经损伤，约20%的幸存者会留有长期后遗症。
目前，全球尚无获批的特效药物或疫苗，这使得每一次疫情的出现都成为一场严峻的挑战。
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G糖蛋白成为治疗和疫苗开发的关键靶点
尼帕病毒的基因组编码六种主要结构蛋白，包括核衣壳蛋白（N）、磷蛋白（P）、基质蛋白（M）、融合糖蛋白（F）、附着糖蛋白（G）和大的RNA依赖性RNA聚合酶（L）。其感染始于病毒进入宿主细胞（特别是呼吸道上皮细胞），这一过程由两个关键的表面糖蛋白介导：宿主细胞附着糖蛋白（G）和膜融合糖蛋白（F）。尼帕病毒的G糖蛋白可与酪氨酸激酶ephrin-B2和ephrin-B3相互作用，这些受体在内皮细胞和神经元细胞上高度表达，使得病毒能够有效靶向宿主细胞。在哺乳动物物种中，这些受体的保守性是尼帕病毒具有广泛物种趋向性的基础。附着糖蛋白（G）在病毒进入和宿主细胞融合中起关键作用，使其成为尼帕病毒治疗和疫苗开发的重要靶点。
图1. 尼帕病毒结构示意图
药物疫苗研发情况
目前，尼帕病毒感染仍缺乏已获准上市的特效抗病毒药物或预防用疫苗。临床干预主要依靠及时隔离患者，并采取以支持性治疗为主的综合管理措施，例如控制脑水肿、提供呼吸机辅助等。值得注意的是，约20%的幸存者可能遗留不同程度的永久性神经系统损伤。在临床应对手段有限的现实下，当前科研工作主要围绕以下三个重点展开：一是针对病毒关键靶点（如L-P聚合酶复合物）开展抗病毒药物研发；二是推进多种候选疫苗的临床前与早期临床研究；三是深入阐明病毒蛋白（如V、W蛋白）调控宿主细胞机制及其在致病过程中的具体作用。
目前尼帕病毒特效药物与疫苗的研发仍面临高生物安全风险挑战，而假病毒技术可通过安全可控的体内外模型模拟真实感染过程，为中和抗体评价、药物筛选等关键环节提供重要工具。
什么是假病毒？
假病毒（Pseudovirus）是指经过改造后的病毒颗粒，是单周期复制病毒。将病毒颗粒进行人工改造，保留其部分特性的同时，成为无致病性的假病毒颗粒。与野生型病毒相比，假病毒具有若干优势，包括高灵敏度和特异性、低成本、易用性，并且假病毒是经过基因改造、缺失复制能力且无致病性的病毒颗粒，因此针对尼帕病毒等高危病原体构建的假病毒，可在*生物安全二级(BSL-2)实验室安全操作，彻底规避了直接操作真病毒(需BSL-4)的巨大风险。
「DIFF CRO」尼帕假病毒系统
「DIFF CRO」采用标准的反向遗传操作技术,通过在VSV载体中插入报告基因eGFP或Luciferase，成功构建NiV-G蛋白的重组VSV病毒（rVSVΔG-NiV-G）。该系统最显著的好处之一是其表达荧光报告基因，使定量研究更容易、更高效。并且rVSVΔG-NiV-G仅能模拟一次入侵过程，无法在普通细胞中增殖扩散，从设计上确保了安全性。
图2.「DIFF CRO」rVSVΔG-NiV-G构建原理示意图
尼帕假病毒的中和抗体检测
中和检测是评估疫苗和疗法抗NiV感染有效性的关键工具。尼帕假病毒以有效地替代尼帕真病毒，允许在BSL-2实验室和进行中和抗体检测。「DIFF CRO」可利用尼帕假病毒提供基于荧光斑点计数法的中和抗体检测服务，检测流程（图10）如下：
图3. 中和抗体检测流程图
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相较于ELISA等方法，基于尼帕假病毒的中和抗体检测方法具有以下优势：
「DIFF CRO」尼帕假病毒体内外药效评价服务
「DIFF CRO」VSV载体构建服务：
参考文献：
Faus-Cotino J, Reina G, Pueyo J. Nipah Virus: A Multidimensional Update. Viruses. 2024 Jan 25;16(2):179.
Tyagi S, Upadhyay S, Bharara T, Sahai S. Nipah virus: Preventing the next outbreak. World J Clin Cases. 2025; 13(11): 99748
Salleh MZ. Structural biology of Nipah virus G and F glycoproteins: Insights into therapeutic and vaccine development. Eur J Microbiol Immunol (Bp). 2025 Apr 22;15(2):83-93.
Jain S, Lo MK, Kainulainen MH, Welch SR, et al. Development of a neutralization assay using a vesicular stomatitis virus expressing Nipah virus glycoprotein and a fluorescent protein. Virology. 2023 Oct;587
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